martes, 20 de febrero de 2018

Práctica 17: Prueba de la coagulasa

PRUEBA DE LA COAGULASA

FUNDAMENTO:

La coagulasa es una proteína producida por varios microorganismos que permite la conversión del fibrinógeno en fibrina. En el laboratorio, se usa para distinguir entre diferentes tipos de Staphylococcus. Un resultado de coagulasa positivo indica que la muestra contiene Staphylococcus aureus. Esta proteína también es producida por Yersinia pestis.
La coagulasa reacciona con la protrombina en la sangre. El complejo resultante se llama estafilotrombina, y permite que la enzima proteasa convierta el fibrinógeno en fibrina. Esto hace que se coagule la sangre. La coagulasa está estrechamente relacionada con la superficie de la bacteria S. aureus y puede revestir su superficie con fibrina al entrar en contacto con la sangre. Se cree que esta cubierta de fibrina del estafilococo es capaz de resistir la fagocitosis haciendo esta bacteria tenga un factor de virulencia mayor.


OBJETIVO:

La prueba de la coagulasa se usa para diferenciar el Staphylococcus Aureus  del Coagulase Negative Staphylococcus. S.aureus produce 2 formas de coagulasa (por ejemplo, coagulasa ligada y coagulasa libre). La coagulasa ligada también conocida como "factor de Clumping " se puede detectar mediante la realización de una prueba de portaobjetos y la coagulasa libre con una prueba de coagulasa de tubo. Nosotros haremos la segunda.

MATERIAL:

-       Plasma
-       Mechero Bunsen
-       Asa de siembra
-       Gradilla
-       Tubo de hemolisis
-       Muestras 5 y 8
-       Baño María
-       Pipeta Pasteur



PROCEDIMIENTO:


1. Introducir un poco de plasma en un tubo de hemólisis.

2. Tomar inóculo de la muestra

3. Homogenizar con el plasma lentamente

4. Incubar tubos en baño maría a 37º durante 30 minutos.

5. Realizar lectura cada cierto tiempo para ver si se forma o no el coágulo. Si pasadas 4 horas no lo ha hecho, damos la prueba como negativa.



RESULTADOS E INTERPRETACIÓN

Muestra 8: Se ha formado el coágulo, por lo que la prueba será positiva.

Muestra 5: No se ha formado el coágulo, la prueba es negativa.


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