Práctica 15: Prueba buiquímica de la potasa

PRUEBA DE LA POTASA

Objetivo:

Es una prueba bioquímica que se utiliza para distinguir las bacterias gram – de las gram +. Ahorra mucho tiempo, pues es más rápido que realizar la tinción de gram en sí.

Fundamento:

El hidróxido de potasio disuelve la pared de lipopolisacáridos de las bacterias gram -. Si al mezclar la carga bacteriana con el hidróxido de potasio al 3%, se forma una masa espesa y pegajosa que se pega al asa de siembra, entonces indicará que es gram -.

Material:

  - Asa de siembra

-       - Mechero Bunsen

-       - Portaobjetos

-       - KOH al 3%

-       - Muestras 5 y 8

-       - Gradilla

-       - Agua destilada

-       - Matraz de 100 ml

-       - Balanza

-       - Pipeta Pasteur

-       - Vidrio de reloj.

Procedimiento:

1. Preparar el espacio de trabajo

2. Machacar el KOH para disminuir el tamaño de los granos

3. Pesar un poco más de 3,33 gramos

4. Echar agua destilada de base en el matraz.

5. Ir echando el KOH y removiendo, mientras se va echando más agua destilada.

6. Enrasar con la pipeta Pasteur hasta 100 ml.

7. Cogemos una gota de la solución realizada anteriormente y la depositamos en el portaobjetos.

8. Coger carga bacteriana con el asa de siembra de nuestra muestra. Esterilizando el asa y enfriando en un esquina.

9. Homogeneizar con la gota de KOH

Resultados e interpretación:

No hay ningún hilillo ni mucosa, por lo que la prueba será negativa para ambas muestras.