Práctica 10: Escala de McFarland

ESCALA DE MCFARLAND

Fundamento:

La escala de McFarland se usa como referencia en suspensiones bacteriológicas, para saber el número de bacterias por milímetro, o más bien de UFC (unidad formadora de colonias), según una escala que va de 0.5 a 10. 

Consiste en unos patrones de turbidez basados en suspensiones de sulfato de bario. Dicha escala consta de 11 patrones, cada uno de los cuales tiene una turbidez comparable a la de una suspensión bacteriana con una densidad determinada.

Material:

- 11 tubos de ensayo

- Mechero Bunsen

- Pipetas de 5ml y 10 ml

- Cremallera

- Micropipetas

- Puntas de micropipeta

- Papel de filtro.

- Bata

- Guantes

- Cabina de bioseguridad

- Matraces

- Vaso de precipitados

Reactivos:

- Cloruro de bario.

- Ácido sulfúrico

Procedimiento:

1. Preparar las disoluciones correspondientes de cloruro de bario y de ácido sulfúrico, empezaremos por la de cloruro de bario.

2. Preparación de ácido sulfúrico:

Cálculos: 

V1 = 500/98 = 5,102 ml de ácido sulfúrico

500 - 5,102 = 494,897 ml de agua destilada

Coger un matraz de 500 ml, depositar en él un poco de agua destilada, 5 ml de ácido sulfúrico y enrasamos hasta 500 ml con agua destilada (495 ml), ya que lo queremos al 1%.

3. Preparación de cloruro de bario

- Pesar 0,587 gramos de cloruro de bario.

- En un matraz de 50 ml se echa agua destilada, y se añade el cloruro de sodio.

- Se enrasa hasta 50 ml con agua destilada (49,41 ml)

4. Rotular los 11 tubos en los que se va a realizar la escala: 0,5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11.

5- Echar en los tubos las siguientes cantidades:

- Tubo 0,5: 24,875 de ácido sulfúrico y 0,125 ml de cloruro de bario

- Tubo 1: 24,75 ml de ácido sulfurico y 0,25 ml de cloruro de bario.

- Tubo 2: 24,5 ml de ácido sulfurico y 0,50 ml de cloruro de bario.

- Tubo 3: 24,25 ml de ácido sulfurico y 0,75 ml de cloruro de bario.

- Tubo 4: 24 ml de ácido sulfurico y 1 ml de cloruro de bario.

- Tubo 5: 23,75 ml de ácido sulfurico y 1,25 ml de cloruro de bario.

- Tubo 6: 23,50 ml de ácido sulfurico y 1,50 ml de cloruro de bario.

- Tubo 7: 23,25 ml de ácido sulfurico y 1,75 ml de cloruro de bario.

- Tubo 8: 23 ml de ácido sulfurico y 2 ml de cloruro de bario.

- Tubo 9: 22,75 ml de ácido sulfurico y 2,25 ml de cloruro de bario.

- Tubo 10: 22,50 ml de ácido sulfurico y 2,50 ml de cloruro de bario.

- Tubo 11: 22,25 ml de ácido sulfurico y 2,75 ml de cloruro de bario.

Resultados:

Escala de McFarland con la que poder comparar la turbidez.